射頻功率放大器在**細胞表面EGFR研究中的應(yīng)用

實驗名稱：超聲激卟啉對s180**細胞表面egfr表達量的影響
研究方向：生物醫(yī)療
測試目的：
血卟啉是從血紅蛋白中提取的**光敏劑，其本身無效應(yīng)，但它可以在動物和人的多種**組織**聚集，易為聲光輻射處理，當它被聲光后能產(chǎn)生強烈的效應(yīng)。美國利用光，這種方法被稱為光動力學療法，簡稱pdt。光動力學療法在臨床主要應(yīng)用于人體表面淺層的**。光在生物組織中的穿透能力差，使其對深部的**受到限制。超聲聯(lián)合血卟啉對小鼠移植**生長抑制有協(xié)同效應(yīng)，發(fā)現(xiàn)單用血卟啉無抑制作用，單用超聲僅有輕微抑制作用，而兩者聯(lián)合則有明顯的抑制效果，并將之命名為聲動力學療法。超聲是一種彈性機械波，其在生物組織中的穿透能力比激光強，同時超聲能夠聚焦于特定部位。聲動力療法對于**細胞有較強的針對性，對正常組織，組織穿透力強，并且機體不產(chǎn)生耐受性，可以反復(fù)多次**，因而它對于**，特別是組織深層**有著較好的應(yīng)用前景。有學者認為sdt或細胞的部分機理是通過超聲的熱效應(yīng)來實現(xiàn)的，但是大量的實驗結(jié)果提示，sdt可能較主要地與超聲聚集在癌組織的血卟啉產(chǎn)生單線態(tài)氧有關(guān)。
測試設(shè)備：ata-8202射頻功率放大器、昆明系小白鼠、艾氏腹水**細胞系、超聲探頭、血卟啉衍生物為單羥乙基單次卟啉、細胞色素c和bax單抗體、caspase-3單抗體、鏈霉卵白素sp試劑盒。
實驗過程：
接種：s180腹水瘤細胞于6只小鼠腹腔1周后，隨機取3只小鼠，抽取腹水細胞，分別置于醫(yī)用薄壁試管，加入rpmi1640+10%小牛培養(yǎng)基中，于37℃孵箱培養(yǎng)，實驗時用生理鹽水調(diào)整細胞濃度至2x106個/ml。每只小鼠抽取的腹水細胞分為12管，分為四組，分別為對照組(ct)、血卟啉組(h)、超聲組(u)和超聲加血卟啉組(uh)，每組三管，每管0.5ml細胞懸液。h組和uh組每管中加入血卟啉4ul，使其終濃度為0.01mg/ml，37℃co2孵箱孵育，45min后u組和uh組分別在頻率為1.8mhz，強度為2w/cm2的超聲裝置中聲照處理3min，各實驗組分別于聲照后1h、3h、5h取材，常規(guī)細胞涂片。
*組織化學染色：以sp法進行*組織化學染色：細胞涂片固定后加3%處理15min，除去內(nèi)源性酶pbs洗3次，加正常動物30min以減少非特異性染色，加egfr一抗4℃過夜，pbs代替一抗作為陰性對照。sp染色按試劑盒說明進行，dab顯色，梯度酒精脫水，中性樹膠封固蓋片。
陽性結(jié)果觀察：各組隨機選取10個高倍視野，利用數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)進行圖像采集和分析。imagepro-plus5.0圖像分析軟件測定各組照片的平均光密度od值(0~255)(用平均光密度表示陽性細胞表達強度，平均光密度值越大則表達越強)。組間t檢驗顯示組間差異。
實驗結(jié)果：
由表中數(shù)據(jù)可以看出，超聲激卟啉處理1h后，uh組、u組平均光密度值明顯**ct組、h組，且uh組平均光密度值**u組，經(jīng)組間t檢驗，uh組與其它組差異較顯著(p<0.01)；超聲激卟啉處理3h后，uh組平均光密度值小幅度下降，ct組、h組基本無變化，u組平均光密度下降。
表1egfr在超聲處理1h、3h、5h后平均光密度值比較(*10-2)
圖1egfr在超聲處理1h、3h、5h后平均光密度值比較(*10-2)
安泰ata-8202射頻功率放大器：
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