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低溫生物知多少？
實驗室的傳代保藏過程
1. 按說明書要求復溶菌粉，轉種于適當的增菌培養基內（g1），復壯后轉接至平板上，并于適當溫度下培養適當時間，分離出單個純種菌落，此為第2代（g2）。
2. 鑒定完成后，挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管，同時挑取純菌落轉接斜面作為工作用。此時，保藏為第2代，但工作用則為第三代。
3. 將第2代管冷凍保存，將工作用于適當溫度下培養適當時間后可用于試驗。
4. 取一支冷凍保存的g2代轉種于平板和斜面培養基上，平板上的制成冷凍保藏管第三代（g3），斜面培養基經適當溫度下培養適當時間后用作工作用（w3）。
5. 將第三代（g3）冷凍或低溫保存，將生長、轉種后的g2經滅菌處理后丟棄。
6. 當工作用代數小于5時，低溫生物*，可直接用上一代工作用轉接下一代工作用，低溫生物*廠家，如w3可直接轉接為w4。
7. 按上述程序操作，直至g4轉為w5為止，需重新開啟安瓿，再重復上述操作程序、保藏和使用。
以上方法中，被分為兩類。傳代用和工作用，傳代用用于甘油冷凍管法保藏，工作用用斜面低溫保藏法保藏。
實驗證明，甘油冷凍管的有效期至少為2年，但其主要適用于*（需氧）、酵母菌的傳代、保藏、*和芽孢類*則需應用其它方法。
低溫生物*的保存方法
低溫保存法
①簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存，保存時間不超過1～2個月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟，以隔絕外界空氣和水汽，保持時間可達3～4個月；
②液氮超低溫保存法，將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中，密封于安瓿管內，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種*、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長期保存。
低溫生物*——*分離方法
寄主分離法即從生長有某種*的寄主體上（如茯苓、木耳木段）取下木片，低溫生物*報價，進行分離的方法。如木耳制種時，可選朵大、出耳多、質厚的耳棒（即長有木耳的木段）。采集后，削去耳根下的樹皮，將其橫斷面鋸成1 厘米厚的木片，在無菌條件下，切去無耳菌絲部分，低溫生物*哪家好，留下有耳菌絲部分，浸入水中1 分鐘，取出再用無菌水沖去木片上的液體。然后，用解剖刀將木片切成0 . 5 厘米的小塊，放入斜面培養基內，置24 ～26 ℃下培養，及時淘汰雜菌，選取純菌絲進行移植培養，即得*。
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