原位雜交-思特進科技發展公司-熒光原位雜交
在選擇探針類型的同時,原位雜交技術,還需要選擇標記方法。探針的標記方法很多,選擇什么標記方法主要視個人的習慣和可利用條件而定。但在選擇標記方法時,還應考慮實驗的要求,原位雜交,如靈敏度和顯示方法等。一般認為放0射性探針比非放0射性探針的靈敏度高。放0射性探針的實際靈敏度不依賴于所采用的標記方法,如隨機引物延伸法往往得到比缺口平移法更高的比活性 。在檢測單拷貝*序列時,應選用標記效0率0高、顯示靈敏的探針標記方法。在對靈敏要求不高時,可采用保存時間長的生物素探針技術和比較穩定的堿性*酶顯示系統。
多種探針標記檢測系統
基于地高3辛、生物素和熒光標記分子的標記和檢測系統是常見的原位雜交檢測方法。
熒光標記檢測常為直接探針標記方法,如在dutp/utp/ddutp上連接fluorescein后進行核酸標記。由于標記在核酸上的熒光分子必須經受雜交和洗脫過程中的考驗,動物組織原位雜交,以及熒光分子易于衰減,其檢測靈敏度受到一定的影響。但對熒光分子的直接檢測呈現的背景較低。
原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精0準確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。
原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。
使用dna或者rna探針來檢測與其互補的另一條鏈在*或其他真核細胞中的位置。
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