Taq酶-武漢友名生物公司(圖)

隨機引物擴增技術(arbitrary primedpcr， ap- pcr)
ap-pcr技術通過隨意設計或選擇一個非特異性引物.在pcr反應體系中.首先在不嚴格條件下使引物與模板中許多序列通過錯配而復性。如果在兩條單鏈上相距一定距離有反向復性引物存在，則可經taq酶的作用使引物延伸而發生dna部分片段的擴增。經一至數輪不嚴格條件下的pcr循環后，再于嚴格條件下進行擴增。擴增的產物經dna測序凝膠電泳分離后.經放1射性自顯影或熒光顯示即可得到dna*圖。ap-pcr用于腫1瘤的**、**的分離;菌1種、菌株及不同物種的鑒定;遺傳作圖;不同分化程度或某些不同狀態下的組織的*表達差異等方面的研究。
pcr反應特異性強：pcr反應的特異性決定因素為：①引物與模板dna特異正確的結合；②堿基配對原則；③taq dna聚合酶合成反應的忠實性；④靶*的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及taqdna聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合（復性）可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶*片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶*區，其特異性程度就更高。
*分型
pcr可用于檢測特定細胞或生物體中等位*的序列差異。例如，taq酶，*敲除和敲入小鼠等生物的*分型[3]。引物對經設計位于目標區域側翼，可根據是否存在擴增子及擴增子長度來檢測遺傳變異。
但是如果為了檢測特定核苷酸突變，則必須對擴增的序列進行進一步分析。例如， pcr擴增子測序就是研究單核苷酸變異（snvs）和單核苷酸多態性（snp）的方法之一。強烈推薦使用高保真dna聚合酶，以防止在pcr過程中引入多余的突變。
通過pcr進行*分型也是對*1癥和遺傳病中的 突變進行遺傳分析的一個基本方式。
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