ISH-思特進

在選擇探針類型的同時，還需要選擇標記方法。探針的標記方法很多，選擇什么標記方法主要視個人的習慣和可利用條件而定。但在選擇標記方法時，還應考慮實驗的要求，ish，如靈敏度和顯示方法等。一般認為放0射性探針比非放0射性探針的靈敏度高。放0射性探針的實際靈敏度不依賴于所采用的標記方法，如隨機引物延伸法往往得到比缺口平移法更高的比活性 。在檢測單拷貝*序列時，應選用標記效0率0高、顯示靈敏的探針標記方法。在對靈敏要求不高時，可采用保存時間長的生物素探針技術和比較穩定的堿性*酶顯示系統。
原位雜交技術應用于染色體、細胞和組織切片等樣品中進行核酸特異性檢測，與免6疫組化技術的結合應用，能將dna、mrna和蛋白水平上的*活性與樣品的顯微拓撲信息結合起來。1969年pardue和gall將放9射性標記的探針直接應用于純化核酸的雜交，此后得益于分子克6隆技術的發展，及不同探針標記系統和檢測系統的應用，大大增加了原位雜交檢測的應用靈活性和檢測靈敏度。
使用分支dna信號擴增的rna fish
invitrogen? viewrna?和primeflow?檢測是使用分支dna信號擴增 (bdna) 來檢測特異性信號的直接熒光rna ish方法。 使用*但兼容的信號擴增系統讓rna靶標的多重復用成為可能。 熒光rna原位雜交檢測分為四個主要步驟：樣本制備、靶標雜交、信號擴增以及檢測。 該方法可實現更高的特異性，更低的背景值和更高的信噪比。
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